1.名称

1.1通用名称：JY-Color-BAP系列骨源性碱性磷酸酶试剂盒

1.2骨源性碱性磷酸酶试剂盒分为成人型JY–Color–BAP–AB、小儿型JY–Color–BAP–NB两种型号，反应装置有单人份、五人份两种不同的规格

2.引言

在骨代谢中，骨形成和骨吸收是既对立又统一的矛盾共同体，任何一方的不正常都会导致骨代谢的不正常，影响骨的正常发育，引起骨疾病，如佝偻病、骨质疏松、Paget`s病等等。反映骨形成的较为特异的生化指标包括骨源性碱性磷酸酶、骨钙素和I型胶原氨基末端肽等。

该项目通过半定量检测人体血液中骨源性碱性磷酸酶催化活性，用以筛查或辅助诊断因钙营养不良引起的骨钙化障碍或其它原因引起的代谢性骨病。

3.原理

血液样品经亲和膜渗滤装置的血浆分离器分离出血浆，经预处理，通过过渡垫到达反应膜，BAP与膜上固定的结合蛋白发生亲和反应，被特异的结合在反应膜上，经洗涤去除其它组分，加入酶底物，BAP催化BCIP（5溴-4氯-3吲哚磷酸盐）水解，产生的吲哚基使NBT（氯化硝基四氮唑兰）还原而显色，在一定范围内，BAP催化活性与色斑深度呈正比，对照标准比色板判读结果。

4.组成

5.样品采集和处理

5.1.样品采集

5.2.采血可以进行指端、耳垂和脚后跟采血，采血时应避免溶血，不能使用抗凝血

5.3.可以用血清或血浆

6.仪器

6.1.微量移液器（17ul，30ul）

6.2恒温水浴箱

7.操作步骤

7.1从2~8℃贮存环境中取出试剂盒，平衡至室温使用（通常需要30分钟）；

提示：反应装置开封后有效期：2小时，试剂瓶开封后有效期：90天

7.2撕开反应装置铝箔条，在反应装置血浆分离器的加样孔中滴加2滴洗涤液，待渗入；

7.3用定量采血管取末梢血30ul（或者微量移液器取17ul血清），加到加样孔中，待渗入；

提示：通常情况下，血液在 2~3 分钟内会完全渗入，如果渗入效果不好，用手按压血浆分离器，帮助血液渗入。

7.4血液渗入后，再在加样孔中滴加2滴洗涤液，待渗入；

提示：本品作人群普查时可在完成该步骤后，将反应装置放在潮湿的容器中密封保存，12小时内集中显色。

7.5从反应装置上取下血浆分离器，可以看见反应滑板上的圆形反应膜；

提示：若圆形反应膜上有其他膜片（过渡垫），用镊子轻轻夹走即可

7.6向反应膜上滴加2滴洗涤液（成人型为终止液），待渗入；

提示：小儿型滴加2滴洗涤液，成人型滴加2滴终止液

7.7推动反应滑板，使圆形反应膜定位在反应装置圆孔中央；

7.8在圆形反应膜中央滴加1滴显色液，置37℃恒温水浴箱内反应      分钟；

提示：① 37℃指的是恒温水浴箱内的气温；

②显色反应时间在每批产品出厂前用质控物校定，应跟据说明书指定的时间内进行，显色反应前，应将试剂平衡至室温。

7.9从恒温水浴箱中取出反应装置，将反应滑板推回原位，在圆形反应膜中央滴加1滴终止液，待渗入，终止反应；

7.1020分钟内，将结果与标准比色板对比，读取测定结果；

提示：本品为一次性使用器具，请妥善处理使用后的物品。

7.11将未开封的反应装置和其他瓶装液体放入试剂盒中，放置2~8℃贮存。

特别提示：试剂盒各组份要求使用同批号产品。

8.结果判读

8.1对照标准比色板，读取颜色最相近的测定结果

8.2标准比色板成人型和小儿型共用一套，比色板上ABAP代表成人型骨源性碱性磷酸酶，NBAP代表小儿型骨源性碱性磷酸酶；

8.3不同色标之间相差25U/L。

9.技术参数

9.1肝胆ALP100U/L、肠ALP150U/L或胎盘ALP150U/L，对成人型骨源性碱性磷酸酶200U/L测定结果无可见干扰；

9.2肝胆ALP100U/L、肠ALP150U/L，对小儿型骨源性碱性磷酸酶200U/L测定结果无可见干扰。

9.3重复性：批内重复性：≥90%；  批间重复性：≥80%。

9.4准确性：测定结果与标本标示值对应的比色板色标比较，非逾值比例数应≥90%

10.使用条件

   15℃～30℃，避免阳光直射。

11.贮存条件

   2℃～8℃，避光保存。

12.有效期

一年。

13.参考文献

1.吴文苑骨型碱性磷酸酶的检测方法和临床应用。国外医学临床生物化学与检验写分册。1999，20（2）：64~65。

2.王加义，文庆成。小儿佝偻病诊断用骨碱性磷酸酶试剂盒研制成功。中华儿科杂志 1994年9月第32卷第5期

3.Evaluation of a new method for separating bone-type alkaline phosphatase.Ann Clin Biochem.1990 Sep;27(Pt5):501-2

4.Quantification of bone alkaline phosphatase in serum by precipitation with wheat-germ lectin:a simplified method and its clinical plausibility,Clin Chem. 1986 Oct;32(10):1960-6

14.技术服务

有关产品技术咨询和投诉，请与厂商客户服务部联系。